如何正确操作HE染色技术实现细胞染色
本文主要涉及HE染色技术的操作流程、染色原理及注意事项等问题。
1. HE染色技术的操作流程是什么?
HE染色技术的操作流程一般包括以下步骤
(1)组织取材取得需要染色的组织样本。
(2)固定将组织样本用10%的中性缓冲福尔马林液固定。
(3)去水将固定的组织样本用蒸馏水洗涤去除福尔马林。
(4)脱脂用酒精对组织样本进行脱脂处理。
(5)染色将组织样本分别浸泡在伊红和伊红-亚甲基绿混合液中,然后用酒精进行脱水处理。
(6)透明将组织样本用二甲苯进行透明处理。
(7)封片将处理好的组织样本放在玻璃片上,用封片剂封住。
2. HE染色技术的染色原理是什么?
HE染色技术是通过伊红和伊红-亚甲基绿混合液相互作用,使细胞核染成红色,胞质染成粉色,胶原纤维染成绿色,从而实现细胞染色。
其中,伊红可以染色细胞核和胞质,其染色原理是伊红与细胞核中的DN分子结合形成紫色染色体,同时伊红与胞质中的蛋白质结合形成粉色细胞质。而亚甲基绿则主要染色胶原纤维,其染色原理是亚甲基绿与胶原纤维中的氨基酸结合形成绿色染色。
3. 在操作HE染色技术时需要注意哪些事项?
在操作HE染色技术时需要注意以下事项
(1)固定时间不宜过长,一般不超过24小时。
(2)去水和脱脂的过程需要充分,否则会影响染色效果。
(3)染色液的浓度和比例需要严格控制,否则会影响染色质量。
(4)脱水处理的时间也需要控制,过长会导致染色失真。
(5)封片时需要注意不要将组织样本压扁或者拉长,否则会影响观察效果。
综上所述,操作HE染色技术需要严格控制操作流程和注意事项,才能实现细胞染色的效果。